在超分辨成像实验中,二向色镜的表面平整度是影响图像信噪比及分辨率的重要因素。关于表面平整度的基本介绍可参见TIRF部分(全内反射荧光)。对基于TIRF的超分辨成像技术(如STORM, PALM, PAINT等),二向色镜的表面平整度好坏主要影响形成TIRF的质量,从而影响图像的信噪比以及分辨率。而对于STED,则主要影响激光光束的质量和形状进而影响激发效率,受激辐射效率以及分辨率。

影响滤光片表面平整度的因素包括反射波前畸变(Reflected wavefront distortion, RWD)和透射波前畸变(Transmitted wavefront distortion, TWD)的大小,楔角的大小以及应力造成的曲率半径的大小(参见TIRF部分)。Chroma通过和相关领域内科学家的多年合作,推出了针对不同超分辨成像技术所用二向色镜的标准。

注意:不要在超分辨成像中采用任何1mm厚度的二向色镜。对于1mm厚度的二向色镜,任何稍微施加的应力所产生的曲率半径都会对成像结果产生严重的影响。除了RWD, TWD和楔角外,厚度同样是影响表面平整度的重要因素。


Thickness

Surface Flatness

Application

1 mm

=/<2 waves/inch P-V

Standard Laser Application (Confocal...)

2 mm

=/<0.5 waves/inch P-V

TIRF, PALM, STORM...

3 mm

=/<0.25 waves/inch P-V

STED, SIM...

=/>5mm thick

Contact us

Custom Applications